- Разновидности исследований методом ПЦР
- Важно знать!
- Что значит вирусологическая нагрузка
- Количественный показатель
- Как проходит обследование?
- Что значит, если РНК гепатита С не обнаружено, а антитела есть?
- Пцр диагностика вирусного гепатита с
- Где сдать анализ
- Виды ПЦР
- Разновидности тестирования и расшифровка результатов
- Определение вируса гепатита С
- Частые вопросы
- Полезные советы
Разновидности исследований методом ПЦР
Анализ методом полимеразной цепной реакции имеет определенные преимущества:
- При таком исследовании проводится определение самого вируса, а не продуктов его жизнедеятельности. При этом существует возможность определить вид возбудителя.
- Методика обладает высокой специфичностью благодаря тому, что исследуется только определенный участок ДНК, уменьшается вероятность получения ошибочных результатов.
- Имеет очень высокую чувствительность, определяется даже минимальное количество вируса в крови.
Существует два основных метода исследования крови на гепатит С при помощи ПЦР: качественный и количественный анализ ПЦР. Качественный метод используется для определения факта наличия вируса. Всем у кого в крови были обнаружены антитела к гепатиту, проводится такой анализ. Результат может быть только двух типов: «обнаружено» и «не обнаружено», последнее значение считается нормой.
Положительный результат теста означает, что в образце были найдены фрагменты РНК вируса, что, в свою очередь, говорит о том, что человек был инфицирован гепатитом. В случае негативного результата возможны два варианта: инфицирования не было или его концентрация настолько мала, что не обнаруживается данной методикой.
Количественный метод отличается по сути исследования, по его задачам и по показаниям. Не все больные гепатитом проходят такой анализ. У него, как и у любого другого, существуют определенные цели. Определение вирусной нагрузки или количественный анализ ПЦР на РНК вируса используется:
- для определения РНК вируса в крови и постановки диагноза «вирусный гепатит»;
- для прогнозирования хронизации гепатита и течения болезни;
- для мониторинга противовирусного лечения и принятия решения о его продлении, сокращении или об изменении тактики лечения.
Исследование проводится при наличии таких показаний:
- гепатит С обнаружен при качественном исследовании и в крови обнаружены антитела;
- при микст-гепатитах;
- если планируется проведение противовирусной терапии;
- во время и после лечения от гепатита С;
- при наличии хронического и острого гепатита С.
Тест проводится для оценки количества единиц вируса в заданном объеме образца крови 1 см³ или 1 мл. Результаты приводятся в цифрах. Показатели используются: МЕ/мл, что означает международная единица на миллилитр и копии на мл, количество копий РНК в 1 мл образца. Чем выше количественный показатель анализа, тем большая вероятность передачи вируса другому человеку.
Р-ДНК — метод разветвленной ДНК. Более простой и недорогой метод. Используется для большего количества образцов, имеет невысокую чувствительность, от 500 МЕ/мл. При такой чувствительности есть вероятность не определить вирус, даже если он присутствует в крови.
ТМА — метод транскрипционной амплификации. Такая методика обнаруживает в крови нуклеиновые кислоты. Имеет невысокую стоимость и при этом высокую чувствительность, от 5–10 МЕ/мл. Относительно новая методика, позволяющая ускорить и удешевить процесс тестирования.
Результаты количественного анализа определение РНК вируса, представленные лабораторией, расшифровываются следующим образом:
Source: successmed.ru
Важно знать!
В НИИ эпидемиологии и инфекционных болезней провели исследования свойств самого известного натурального средства очистки печени. В результате 30-ти дневного исследования группы добровольцев из 100 человек, страдающих гепатитом. Были получены следующие результаты:
- Зафиксировано резкое улучшение здоровья у всей группы испытуемых от 25 до 68 лет.
- Было отмечено ускорение регенерационных процессов у 97 добровольцев.
- Улучшение обменных процессов в организме.
- У мужчин после 30 лет отмечено улучшение потенции и повышение либидо.
Более подробно о результатах исследования читайте здесь.
Да, гепатит сам по себе очень опасен, у моей знакомой, не очень хорошей, был он, а может и есть до сих пор. Постоянные проблемы со здоровьем. С печенью вообще беда, она просто поражает чуть ли не первой печенку. А потом болела она долго и уже чуть не хронически. Я тоже недавно проходила на Гипатит С проверку, сдавала анализы. Благо нет у меня его. Хоть это было не так просто, я сдала, да. Но вот врачи очень долго вычисляли это, прям как тут и написано.
- Олег к записи Насколько эффективно лечение варикоза магнитотерапией
- Елена к записи Можно ли пить коньяк при низком давлении
- Анна к записи Почему на руках без причины появляются синяки и гематомы
- Светлана к записи Можно ли есть чеснок при гипертонии
- Марина к записи Почему кровоточат десны и как их лечить
Информация, размещенная на портале, не является руководством по самолечению и НЕ заменяет консультации врача! Сайт может содержать контент, не предназначенный для лиц младше 16 лет.
Source: medicinavdome.ru
Что значит вирусологическая нагрузка
При подозрении на гепатит С пациенту приходится сдавать множество анализов, названия которых понятны далеко не всегда. Попробуем разобраться в специальных медицинских терминах и обозначениях тестов, назначаемых врачом. Для обследования больного проводят анализы по двум основным методикам.
- Серологическое исследование. В лабораторном бланке часто обозначается как anti-HCV. Тест предназначен для выявления антител (иммуноглобулинов) к возбудителю гепатита С, которые достигают определяемого уровня на 4–6 неделе после заражения. Но по титру АТ к HCV можно только приблизительно определить тяжесть заражения.
- Молекулярные исследования. Включают несколько тестов. Обозначается как ПЦР (полимеразная цепная реакция). Анализ достаточно сложен в исполнении и позволяет установить РНК вируса в кровотоке. Самый простой тест – качественный, когда определяют только присутствие HCVв сыворотке. Количественный позволяет выяснить точное количество копий РНК в 1 мл крови. При помощи генотипирования устанавливают структуру вириона и точную разновидность HCV (I–VI).
Количественную ПЦР проводят не сразу. Максимально возможной чувствительностью характеризуются тест-системы, используемые для постановки качественного исследования. Но высокая стоимость анализа ограничивает его повсеместное применение. Для рутинной диагностики применяют более простой в проведении ИФА.
Дальнейшее обследование проводят при позитивном ИФА. Ранее качественная ПЦР считалась более чувствительной, чем количественная. Но современные тест-системы позволяют определить количество вируса гепатита С в крови при показателях 5 МЕ/мл и выше.
Лаборатории могут использовать разные наборы для постановки количественного анализа. Поэтому все исследования лучше проводить в одном месте, чтобы не допустить погрешности в показаниях тестов.
Какая вирусная нагрузка бывает при гепатите С? Для ответа на этот вопрос используют не только числовые показатели.
Для удобства диагностики и прогнозирования исхода заболевания виремию делят на группы:
- низкая;
- высокая.
В некоторых медицинских источниках дополнительно используют термины «умеренная» и «очень высокая». На многих форумах пациенты нередко жалуются на погрешности при проведении количественной ПЦР. Дело в том, что разные тест-системы могут отличаться по интерпретации результатов. Если ранее виремию обозначали в копиях РНК/мл, сейчас все современные лаборатории указывают показатель в Международных Единицах ( МЕ/мл).
Количественный показатель
Важно не только правильно подготовиться к анализу и сдать биологический образец в лабораторию, но и расшифровать полученные данные. Это должен делать только квалифицированный врач
Конечно, на бланке с результатом уже имеется информация о принятых нормах и проставлены значения пациента. Однако цифры это еще не все, опыт и медицинские знания позволяют получить больше информации. Таблица показывает, какой результат может показать анализ ПЦР на гепатит тип С количественный:
Значение |
|
---|---|
Нет | Вирус в организме человека отсутствует, это нормальный показатель для здорового человека. Также такой результат может быть, если концентрация вируса ничтожно мала и находится ниже чувствительности теста. |
Менее 1,8×102 | Содержание вируса в исследуемом биологическом образце ниже линии границы. |
Менее 8×105 | Обнаружено незначительное количество вируса, заболевание в начальной стадии. Для пациента это хороший прогноз, возможность назначения эффективного лечения и полное выздоровление в большинстве случаев. |
Более 8×105 | Концентрация вируса высокая, требуется немедленное лечение. Организм подвергается серьезной нагрузке. |
Более 2,4×107 | Концентрация вируса очень высокая, выше линейного диапазона. При составлении прогноза учитываются все факторы, лечение может быть длительным, а болезнь может перейти в хроническую форму. |
Для лечения гепатита С количественный анализ имеет первостепенное значение. От того, насколько сильно вирус поразил организм, зависит назначение препаратов и дальнейший прогноз для пациента. Кроме концентрации гепатита С в крови, с помощью ПЦР можно определить генотип вируса. И если данный тип возбудителя болезни не характерен для местности, в которой проживает больной, можно отследить путь заражения и предотвратить вспышку гепатита в регионе.
Как проходит обследование?
Чтобы сделать количественный ПЦР вирусной РНК гепатита С, надо соблюдать методику выполнения исследования:
- Лучше всего для тестирования подходит венозная кровь. Анализы сдаются натощак. Пациенту не рекомендуют есть жирную и жареную пищу, пить спиртное за два дня до манипуляции.
- После забора биологического материала, его доставляют в лабораторию, обрабатывают.
- ПЦР состоит из трёх этапов (подготовка, увеличение копий ДНК возбудителя, идентификация) на каждом из которых используется определённое оборудование и реактивы.
- Образцы, взятые для исследования, маркируются. Из них с помощью реагентов выделяют РНК вируса, обозначенного качественным ПЦР.
- Процесс амплификации (создание и увеличение копий) проходит несколько раз посредством изменения температуры материала (нагревания, охлаждения) с использованием реактивов.
- На последнем этапе происходит определение вирусной нагрузки. Результат исследования интерпретирует лечащий врач, у которого есть расшифровка, таблица значений и итоги предварительной диагностики.
Что значит, если РНК гепатита С не обнаружено, а антитела есть?
Присутствие антител говорит о хорошем иммунитете. Часть людей (до 10%) способны самостоятельно излечиваться. Организм способен подавить вирус, без препаратов. Часто НСV у таких людей нет, а ИФА-тест показывает присутствие антител.
Другой вариант подобных результатов – выздоровление пациента. Для эффективного иммунного ответа порой требуются годы. Хроническая форма с периодами ремиссий способна обостриться. Тяжело переносят гепатит С люди с острой формой заболевания, когда глобулины поражают гепатоциты, на которых остались следы пребывания возбудителя.
Наличие антител при отсутствии РНК – самый благоприятный результат комплексного обследования.
Пцр диагностика вирусного гепатита с
Сейчас заразиться гепатитом С может каждый. Ранее данное заболевание преобладало среди неблагополучного населения, в частности, наркоманов. Однако в настоящее время оно получило широкое распространение.
Гепатит С передается через кровь. В связи с этим заражение возможно в учреждении здравоохранения, и даже если вы делаете банальный маникюр у профессионального мастера. Инкубационный период составляет 6 месяцев, бессимптомная хроническая форма – до нескольких десятилетий, что приводит к циррозу. Острый гепатит С имеет следующие проявления:
- жар;
- апатичное состояние, постоянную усталость;
- рвоту либо тошноту;
- дискомфорт в абдоминальной области и суставах;
- желтуху.
Треть людей с острым гепатитом не нуждается в терапии, так как их организм самостоятельно уничтожает инфекцию.
Опасность гепатита С кроется в его способности к мутированию. С помощью изменения строения гена он может стать невидим для иммунной системы. В этом случае тестирование выявит хронический гепатит С. Пациенту с подобным диагнозом делается биопсия печени (в целях установления серьезности поражения), а также проводится дополнительный тест на установление генотипа вируса.
Основной способ инфицирования гепатитом – через кровь. Вирусные агенты, оказавшись в здоровой клетке, вместе с кровотоком достигают печени, где активно размножаются.
Самым надежным способом, позволяющим обнаружить в крови следы вируса, специалисты называют ПЦР анализ. Суть революционного метода полимеразной цепной реакции состоит в обнаружении цепочек вирусных РНК при создании определенной среды, куда помещают взятую на анализ пробу крови. Этапы диагностического процесса:
- После получения отобранного биоматериала в нем тиражируют множество копий РНК, принадлежащих вирусу гепатита С.
- Использованием многофункциональных тестовых систем с нагреванием и очисткой раствора добиваются необходимого количества копий.
- При помощи тестовой диагностики определяют концентрацию в анализируемом образце сформировавшихся генов.
Под аббревиатурой РНК подразумевают рибонуклеиновую кислоту. Важная макромолекула вместе с ДНК присутствует в составе клеток любого живого организма. Молекула РНК, хранящая генетический код вируса гепатита С, склонна мутировать.
В процессе нескольких этапов диагностики происходит трансформация нуклеотидных цепочек с формированием РНК вируса гепатита С, если порция крови пациента содержала фрагменты возбудителя.
Безоговорочная достоверность ПЦР тестирования объясняется высоким уровнем чувствительности полимеразной реакции, обладающей следующими преимуществами:
- Для обнаружения HCV достаточно одного генома вируса на весь объем биоптата;
- Высокая способность к генотипированию для выявления определенного возбудителя;
- Возможность за одно тестирование обнаружить РНК различных типов вирусов.
Проведение лабораторного анализа вооружает специалиста информацией о наличии либо отсутствии РНК вируса в пробе крови. Благодаря тестированию можно определить концентрацию РНК различных типов вирусных частиц.
ПЦР-диагностика показана пациентам:
- при подозрении на воспаление печени без проявления симптомов патологии;
- для проведения скрининга во время профилактических мероприятий;
- в ходе обследования людей после контакта с инфицированным человеком;
- при хроническом гепатите для оценки активности размножающегося вируса;
- для выяснения степени эффективности проведенной терапии.
В группу риска также водят дети, рожденные от матерей, имеющих печеночную патологию. Анализ необходим при хронических болезнях печени неустановленной природы.
Где сдать анализ
При обращении в поликлинику, пациент имеет право на бесплатные анализы. Но сначала сдают тест ИФА. И только при положительном либо сомнительном результате показано исследование методом ПЦР. Поэтому провести срочную диагностику можно обратившись в платную лабораторию, где сдать кровь на ПЦР можно в удобное для пациента время. Одновременно рекомендуют сразу проверить показатели печеночных ферментов, стандартные клинические параметры крови.
Как правило, изучение крови методом ПЦР доступно практически в любой лаборатории. Если пункт забора крови не оснащен должным оборудованием, биологический материал транспортируют для проведения исследования с соблюдением температурного режима и других условий. Проведение ПЦР в поликлинике возможно только после других обследований, результаты которых косвенно укажут на наличие гепатита С.
Виды ПЦР
Выделяют следующие виды ПЦР:
- Качественный анализ. Такое исследование помогает обнаружить возбудителя патологии в биоматериале. Анализ не отличается высокой чувствительностью. По этой причине результат может быть недостоверным. Чтобы избежать этого, рекомендуется проводить анализ в лаборатории, где используют тест-систему с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если в расшифровке указано «отрицательней ответ» или «не обнаружено», то гепатит С не диагностируют или назначают другое исследование для подтверждения результата. Если анализ дает положительный ответ, эти данные подтверждаются или опровергаются иными анализами.
- Количественный анализ. Такое исследование помогает не только диагностировать патологию, но и выявить вирусную нагрузку. Это показатель, который определяет концентрацию РНК вируса в биоматериале. На основании полученный данных специалист делает заключение о том, заражен ли пациент, а также о степени тяжести патологии в случае положительного ответа исследования. Исследование также помогает выбрать правильную терапевтическую линию и оценить эффективность проводимого лечения. При диагностике гепатита С проведение количественного анализа назначается несколько раз.
- Генотипирование. Вирус обладает способностью к модификации. По этой причине выбор подходящих медикаментозных препаратов для проведения терапии осуществляется на основе генотипа возбудителя. От вида вируса зависит эффективность лечения и его продолжительность. Если диагностирован гепатит HCV 1, то продолжительность медикаментозной терапии составляет 12 месяцев. При этом положительный результат будет наблюдаться только у 60 пациентов из 100. Если определяется генотип вируса второго и третьего типа, то с ними помогают справиться противовирусные препараты. Положительный результат отмечается у 85 пациентов из 100. Если исследование показало результат «вирус не типируется», то возникновение патологии спровоцировал возбудитель, который не может определиться тест-системами.
Косвенными признаками HCV является превышение норм печеночных трансаминаз, билирубина, лейкоцитоз, ускорение СОЭ, наличие билирубина в моче.
В отличие от ИФА вероятность ложного результата ПЦР практически нулевая. Ошибки возможны только в результате человеческого фактора, то есть при нарушении правил забора крови, хранения образцов и непосредственно проведении исследования.
Показания | Прогноз/интерпретация |
до 1,8х10 000 МЕ/мл | |
до 8х10 (5) МЕ/мл | |
{amp}gt; 8х10 (5) МЕ/мл | |
{amp}gt; 2,4х10(7) МЕ/мл |
Стоит отметить, что несмотря на критерии стандартов, случаются исключения, при которых врачам удавалось при результате {amp}gt; 2,4х10(7) МЕ/мл поставить человека на ноги. Следовательно, итог зависит и от иммунной системы человека, положительная динамика которой стала редкостью в современном мире.
Если человек здоров и его ничего не беспокоит, то итогом проведенной диагностики будет являться “не обнаружено”. А вот у тех, кто уже заболел, но при этом проводит комплексное лечение, то улучшение показателей — это сигнал к выздоровлению. К примеру, самый благоприятный диапазон вирусных рамок колеблется от 1,8х10 (2) до 2,4х10 (7) МЕ/мд, где 600 МЕ/мл — низкая концентрация, 3х10 (4) МЕ/мл — средняя, а более 8х10 (5) мЕ/Мл — уже высокая.
Разновидности тестирования и расшифровка результатов
Хроническую стадию заболевания печени сопровождают признаки фиброза с разрастанием соединительных тканей, что со временем нарушает структуру органа. Если вовремя начать лечение, повышается вероятность обратимости фиброза. Именно для выбора адекватной терапии важен учет результатов диагностики HCV, выполняемой поэтапно:
- Сначала методом качественного тестирования пытаются обнаружить следы вируса.
- Результаты количественного теста уточняют концентрацию в пробе вирусной РНК.
- Методом генотипирования устанавливают, к какому генотипу принадлежит возбудитель.
Ряд медиков считает диагностику на РНК вирусного гепатита обязательной для большинства пациентов, даже не имеющих характерных для патологии симптомов. Появление определенных жалоб уже свидетельствует о запущенном процессе с поражением печени циррозом, некрозом, онкологией.
В домашних условиях можно самостоятельно выполнить несложную диагностику гепатита, пользуясь экспресс-тестом ИФА. Тестовый комплект позволяет определить наличие антител к РНК вируса всего за 15 минут по капле крови. При выявлении антител потребуется дальнейшее обследование.
Задача начального этапа исследования – подтвердить наличие в тестируемом объеме генетических фрагментов HCV, если анализ крови показал наличие у пациента антител, готовых атаковать вирус гепатита С
Интерпретация результатов качественной диагностики имеет две позиции, с их особенностями важно ознакомиться:
- «РНК обнаружено». Положительный вариант результата указывает, что биологическая жидкость содержит фрагменты РНК возбудителя гепатита. Интерпретация показателя является подтверждением факта инфицирования: вирус размножается в крови носителя, печень подвергается разрушению.
- «РНК не обнаружено». При отрицательном варианте результата сохраняется вероятность малой концентрации вирусной РНК даже при явном отсутствии ее фрагментов. Тест не сможет выявить ничтожную концентрацию вирионов при недавнем заражении либо предшествовавшей противовирусной терапии.
Обнаружения РНК возбудителя по методике качественного тестирования, обеспечивающего 95% точности, достаточно для подтверждения гепатита С. Достоверность качественного этапа анализа ПЦР обеспечивает система с определенным порогом чувствительности (до 500 МЕ/мл).
При низкой виремии (концентрация вируса) потребуется помощь диагностической системы с показателем минимум 50 МЕ/мл. По результатам следующей части анализа определяют концентрацию вирионов в объеме исследуемого биоматериала.
Определение вируса гепатита С
Стандартная норма гепатита С – это размеры от 40 до 60 нм, с большинством липидов, поражение печени в результате острого или хронического течения болезни. Гепатит С, а именно РНК-вирус семейства Togaviridae, крайне стойкий, передается путем переливания крови или использования нестерильных предметов, неправильная гигиена ванных принадлежностей и др. Количественный анализ позволяет исследовать кровь и выявить генетическую структуру инфицируемого вируса.
Чтобы гепатит С и его генотипы были определены, проводят количественный анализ. В зависимости от анализатора могут определить три уровня заболеваемости РНК-вирусом.
Субтипы могут производить различные модификации, поэтому специфика и чувствительность анализатора должна быть на сто процентов. Помимо обнаружения болезни у пациента, необходимо определить степень его тяжести. Некоторые лаборатории не имеют полностью всех данных по расшифровкам РНК-вируса, есть вероятность ложноположительного ответа.
Исследование на гепатит С будет точнее при изучении таких показателей:
Обратив внимание на результаты этих показателей и общее состояние организма, выводится результат, показывающий степень зараженности, форму, а также количество клеток гепатита С в крови. Это способствует процессу выздоровления и эффективности противовирусной терапии
Частые вопросы
Какая является нормой количественного содержания РНК вируса гепатита C?
Норма количественного содержания РНК вируса гепатита C определяется в лаборатории и может варьироваться в зависимости от используемого метода исследования. Обычно норма составляет менее 15-25 международных единиц на миллилитр (МЭ/мл).
Какие факторы могут повлиять на количественное содержание РНК вируса гепатита C?
Количественное содержание РНК вируса гепатита C может быть повышено при острой или хронической инфекции, а также при реактивации вируса. Однако уровень вирусной нагрузки также может колебаться в зависимости от индивидуальных особенностей организма и динамики заболевания.
Какие методы используются для количественного исследования РНК вируса гепатита C?
Для количественного исследования РНК вируса гепатита C чаще всего применяют метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Этот метод позволяет определить количество вирусной РНК в биологическом материале пациента, таком как кровь или сыворотка.
Полезные советы
СОВЕТ №1
При количественном исследовании РНК вируса гепатита C важно учитывать, что норма может различаться в зависимости от используемого метода анализа. Поэтому рекомендуется обращаться к лаборатории, проводящей исследование, для получения точной информации о норме для конкретного метода.
СОВЕТ №2
При интерпретации результатов количественного исследования РНК вируса гепатита C следует учитывать, что норма может быть выражена в разных единицах измерения, таких как копий/мл или МЕ/мл. Важно уточнить, в каких единицах представлены результаты исследования, чтобы правильно оценить их.